CRYNODEB AC ESBONIAD Y PRAWF
Mae malaria yn salwch hemolytig, twymyn a gludir gan fosgitos sy'n heintio dros 200 miliwn o bobl ac yn lladd mwy nag 1 miliwn o bobl y flwyddyn.Mae'n cael ei achosi gan bedair rhywogaeth o Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale, a P. malariae.Mae'r plasmodia hyn i gyd yn heintio ac yn dinistrio erythrocytes dynol, gan gynhyrchu oerfel, twymyn, anemia, a splenomegaly.Mae P. falciparum yn achosi afiechyd mwy difrifol na'r rhywogaethau plasmodial eraill ac yn cyfrif am y rhan fwyaf o farwolaethau malaria.P. falciparum a P. vivax yw'r pathogenau mwyaf cyffredin, fodd bynnag, mae amrywiad daearyddol sylweddol yn nosbarthiad rhywogaethau.
Yn draddodiadol, mae malaria yn cael ei ddiagnosio trwy arddangosiad yr organebau ar Giemsa â staeniau trwchus o waed ymylol, ac mae'r gwahanol rywogaethau o plasmodium yn cael eu gwahaniaethu gan eu hymddangosiad mewn erythrocytes heintiedig1.Mae'r dechneg yn gallu gwneud diagnosis cywir a dibynadwy, ond dim ond pan gaiff ei berfformio gan ficrosgopyddion medrus gan ddefnyddio protocolau diffiniedig2, sy'n cyflwyno rhwystrau mawr i ardaloedd anghysbell a thlawd y byd.
Mae Pecyn Prawf Cyflym Malaria Pf / Pan Antigen yn cael ei ddatblygu ar gyfer datrys y rhwystrau hyn.Mae'r prawf yn defnyddio pâr o wrthgyrff monoclonaidd a polyclonaidd i brotein penodol P. falciparum, Histidine Ailadrodd Protein II (pHRP-II), a phâr o wrthgyrff monoclonaidd i plasmodium Lactate Dehydrogenase (pLDH), protein a gynhyrchir gan y pedair rhywogaeth o'r plasmodium, a thrwy hynny yn galluogi canfod a gwahaniaethu ar yr un pryd â'r haint plasmodiwm tri neu falcipa.Gellir ei berfformio gan bersonél heb eu hyfforddi neu â'r sgiliau lleiaf posibl, heb offer labordy.
EGWYDDOR
Mae pecyn Prawf Cyflym Pf/Pan Malaria yn brawf imiwn cromatograffig llif ochrol.Mae cydrannau'r stribedi prawf yn cynnwys: 1) pad cyfun lliw byrgwnd sy'n cynnwys gwrthgorff gwrth-PHRP-II llygoden wedi'i gyfuno ag aur colloid (cyfuniadau aur pHRP II) a gwrthgorff gwrth-pLDH llygoden wedi'i gyfuno ag aur colloid (cyfuniadau aur pLDH),
2) stribed bilen nitrocellulose sy'n cynnwys dau fand prawf (bandiau Pan a Pv) a band rheoli (band C).Mae band padell wedi'i orchuddio ymlaen llaw â gwrthgorff gwrth-pLDH monoclonaidd lle gellir canfod yr haint ag unrhyw un o'r pedair rhywogaeth o plasmodia, mae'r band Pf wedi'i orchuddio ymlaen llaw â gwrthgyrff gwrth-pHRP-II polyclonaidd ar gyfer canfod haint Pf, ac mae'r band C wedi'i orchuddio â IgG gwrth-lygoden gafr.
Yn ystod yr assay, mae cyfaint digonol o'r sbesimen gwaed yn cael ei ddosbarthu i ffynnon sampl (S) y casét prawf, mae byffer lysis yn cael ei ychwanegu at y ffynnon glustogi (B).Mae'r byffer yn cynnwys glanedydd sy'n lyses y celloedd gwaed coch ac yn rhyddhau antigenau plasmodium amrywiol, sy'n mudo trwy weithred capilari ar draws y stribed a gedwir yn y casét.Bydd pHRP-II os yw'n bresennol yn y sbesimen yn rhwymo i'r cyfuniadau pHRP II-aur.Yna caiff yr imiwnocomplex ei ddal ar y bilen gan y gwrthgyrff gwrth-pHRPII wedi'u gorchuddio ymlaen llaw, gan ffurfio band Pf lliw byrgwnd, sy'n nodi canlyniad prawf positif Pf.Bydd pLDH os yw'n bresennol yn y sbesimen yn rhwymo i'r cyfuniadau aur pLDH.Yna caiff yr imiwnocomplex ei ddal ar y bilen gan yr gwrthgorff gwrth-PLDH wedi'i orchuddio ymlaen llaw, gan ffurfio band Pan lliw byrgwnd, sy'n nodi canlyniad prawf positif plasmodium.Yn absenoldeb band Pan, gellir argymell canlyniad prawf positif ar gyfer unrhyw un o'r tri plasmodia arall.
Mae absenoldeb unrhyw fandiau prawf (Pan a Pf) yn awgrymu canlyniad negyddol.Mae'r prawf yn cynnwys rheolaeth fewnol (band C) a ddylai arddangos band lliw byrgwnd o'r immunocomplex o gafr gwrth-lygoden IgG / llygoden IgG (pHRP-II a pLDH-aur cyfuniadau) waeth beth fo'r datblygiad lliw ar unrhyw un o'r bandiau prawf.Fel arall, mae canlyniad y prawf yn annilys a rhaid ailbrofi'r sbesimen gyda dyfais arall.
