CRYNODEB AC ESBONIAD Y PRAWF
Mae malaria yn salwch hemolytig, twymyn a gludir gan fosgitos sy'n heintio dros 200 miliwn o bobl ac yn lladd mwy nag 1 miliwn o bobl y flwyddyn.Mae'n cael ei achosi gan bedair rhywogaeth o Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale, a P. malariae.Mae'r plasmodia hyn i gyd yn heintio ac yn dinistrio erythrocytes dynol, gan gynhyrchu oerfel, twymyn, anemia, a splenomegaly.Mae P. falciparum yn achosi afiechyd mwy difrifol na'r rhywogaethau plasmodial eraill ac yn cyfrif am y rhan fwyaf o farwolaethau malaria.P. falciparum a P. vivax yw'r pathogenau mwyaf cyffredin, fodd bynnag, mae amrywiad daearyddol sylweddol yn nosbarthiad rhywogaethau.
Yn draddodiadol, mae malaria yn cael ei ddiagnosio trwy arddangosiad yr organebau ar staeniau Giemsa yn taenu gwaed ymylol trwchus, ac mae'r gwahanol rywogaethau o plasmodium yn cael eu gwahaniaethu gan eu hymddangosiad mewn erythrocytes heintiedig.Mae'r dechneg yn gallu gwneud diagnosis cywir a dibynadwy, ond dim ond pan gaiff ei berfformio gan ficrosgopyddion medrus gan ddefnyddio protocolau diffiniedig, sy'n cyflwyno rhwystrau mawr i ardaloedd anghysbell a thlawd y byd.
Mae Prawf Cyflym Malaria Pf/Pv yn cael ei ddatblygu ar gyfer datrys y rhwystrau hyn.Mae'n defnyddio gwrthgyrff sy'n benodol i P. falciparum Histidine Rich Protein-II (pHRP-II) ac i P. vivax Lactate Dehydrogenase (Pv-LDH) i ganfod a gwahaniaethu haint gyda P. falciparum a P. vivax ar yr un pryd.Gall y prawf gael ei berfformio gan bersonél heb eu hyfforddi neu â'r sgiliau lleiaf posibl, heb offer labordy
EGWYDDOR
Mae Prawf Cyflym Malaria Pf/Pv Ag imiwnedd cromatograffig llif ochrol.Mae'r cydrannau prawf stribed yn cynnwys: 1) pad cyfun lliw byrgwnd sy'n cynnwys gwrthgorff gwrth-Pv-LDH llygoden wedi'i gyfuno ag aur colloid (cyfuniadau Pv-LDH-aur) a gwrthgorff gwrth-pHRP-II llygoden wedi'i gyfuno ag aur colloid (pHRP-II-aur cyfun), 2) stribed prawf bandf nitrocellulose a dau bilen rheoli bandP (bandv prawf nitrocellwlos) sy'n cynnwys bandP bandf Pv)Mae'r band Pv wedi'i rag-orchuddio â gwrthgorff llygoden penodol gwrth-Pv-LDH arall ar gyfer canfod haint Pv, mae'r band Pf wedi'i rag-orchuddio â gwrthgyrff gwrth-pHRP-II polyclonaidd ar gyfer canfod haint Pf, ac mae'r band C wedi'i orchuddio â IgG gwrth-lygoden gafr.
Yn ystod yr assay, mae cyfaint digonol o'r sbesimen gwaed yn cael ei ddosbarthu i ffynnon sampl (S) y casét prawf, mae byffer lysis yn cael ei ychwanegu at y ffynnon glustogi (B).Mae'r byffer yn cynnwys glanedydd sy'n lyses y celloedd gwaed coch ac yn rhyddhau antigenau amrywiol, sy'n mudo trwy weithred capilari ar draws y stribed a gedwir yn y casét.Bydd Pv-LDH os yw'n bresennol yn y sbesimen yn rhwymo i'r cyfuniadau aur Pv-LDH.Yna caiff yr imiwnocomplex ei ddal ar y bilen gan yr gwrthgorff gwrth-Pv-LDH wedi'i orchuddio ymlaen llaw, gan ffurfio band Pv lliw byrgwnd, sy'n nodi canlyniad prawf positif Pv.Fel arall, bydd pHRP-II os yw'n bresennol yn y sbesimen yn rhwymo i'r cyfuniadau aur pHRP-II.Yna caiff yr imiwnocomplex ei ddal ar y bilen gan y gwrthgyrff gwrth-pHRP-II wedi'u gorchuddio ymlaen llaw, gan ffurfio band Pf lliw byrgwnd, sy'n nodi canlyniad prawf positif Pf.Mae absenoldeb unrhyw fandiau prawf yn awgrymu canlyniad negyddol.Mae'r prawf yn cynnwys rheolaeth fewnol (band C) a ddylai arddangos band lliw byrgwnd o'r imiwn-gymhleth o IgG gwrth-lygoden gafr / llygoden IgG (gwrth-Pv-LDH a gwrth-pHRPII) - cyfunau aur waeth beth fo'r datblygiad lliw ar unrhyw un o'r bandiau prawf.Fel arall, mae canlyniad y prawf yn annilys a rhaid ailbrofi'r sbesimen gyda dyfais arall.
